Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者十分困难缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次消失呼吸道自身突变到消失1型式冠心病针灸症状的方面率在青少年时期就有良好的说明了，多个呼吸道自身突变特征性的青少年中的有70%在血清切换后10月内患上冠心病，而随访15年的青少年这一%-减低到84%。比起之下，占针灸1型式冠心病一半以上的型式1型式冠心病的复发有助于还无法给予充分的研究成果。

愈加多的人开始用于再行系统来表述1型式冠心病的方面：幼体在消失多种呼吸道自身突变时进入第1先前，消失血糖异常时进入第2先前，消失症状时进入第3先前。一些多发呼吸道自身突变特征性的幼体，在1期和2期，方面较极快，并发展为复发的1型式冠心病。我们先前说明了了除此以外在首次探测到多种呼吸道自身突变试样后至少10年无冠心病的想像中极快方面者，这小组患儿人口数少，但形态非常确切。随后，我们注意到呼吸道血栓依赖性CD8+T线粒体重排在方面较极快的患儿中的大体上不存有，但在未来会复发和起因于的冠心病患儿中的很容易探测到。这意味著暗示，与方面患儿比起，这些患儿血栓重排的调节增强。

更早研究成果暗示，尽管调节性T线粒体(Treg)比例短时间，但冠心病患儿存有一些特性局限性，其中的包括对IL-2的重排并能降低。此外，冠心病患儿中的的现象CD4+T线粒体意味著对调节更是具抵抗性，表现为现象T线粒体的可抑制移向，自然产生的Treg和排泄产生的其会Treg，以及免疫经历的CD4+T线粒体中的IL-2重排移向。本研究成果的目的是说明了了CD4+调节性T线粒体(Treg)在领头想像中较极快方面者中的的形态，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

原理：BOX研究成果是一项以人群辅以的纵向研究成果，在21岁此表胃癌的患儿亲人中的检查1型式冠心病的可怕因素。我们先前说明了了近十年较极快方面者的形态，他们依然多重呼吸道自身突变特征性至少10年，但无法消失冠心病的针灸症状，极快性或非顺利进行性血栓。随后，10名此后依然无冠心病并不愿透过大量血液试样的较极快方面者纳入T和B线粒体特性分析原理。在目前的研究成果中的，8名极快方面者(SP小组)，中的位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁中间的呼吸道自身突变特征性。所有的参与者都属于1型式冠心病方面的1期，尽管一些人随后失去了呼吸道自身突变对某些免疫的特征性重排，然而，一名患儿并未属于2期至少6年，但无法消失针灸症状，一名患儿被临床为冠心病，该成年人72岁，在采集实验试样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据分析原理中的对该小分子顺利进行了直接指标。复合外周血单个核分裂线粒体(PBMCs)，采用多常量流式线粒体术和T线粒体可抑制试验车指标小分子中的Treg的频带、表型式和特性。用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和回归)顺利进行无指派聚类分析原理，指标Treg表型式。

结果：与肥胖小分子比起，来自极快方面体的无意识CD4+T线粒体的指派聚类表明，可抑制的无意识CD4+ Treg频带减低，与低剂量其会的TNFR相关蛋白(GITR)隐含减低有关。一名HbA1c升高的患儿与方面较极快者和也就是说的印证小组比起，Treg谱有所不尽相同。特性分析原理暗示，与肥胖小分子比起，来自较极快方面体的Treg可抑制的CD4+现象T线粒体可抑制微小受损。表现为对现象CD4+T线粒体CD25和CD134隐含的可抑制减低。

由此可知1 系统地的表型式分析原理表明，CD4+Treg流感病毒在极快方面数据流中的减低。由FlowSOM聚合的Treg二楼，围住在来自所有小分子的活CD4+CD45RA -线粒体上。根据上标物隐含鉴定出10个元簇:无意识T线粒体_1;无意识T cell_2;无意识T cell_3;无意识T cell_4;CD49b无意识T线粒体;HLA-DR + GITR +无意识T线粒体;存储器Treg_1;存储器Treg_2;存储器Treg_3;和存储器Treg_4。(a)用于9个不尽相同Treg上标聚合的10个元簇的MST。每个路由表象征性一个一个大(100个一个大)，更是大的元一个大(10个元一个大)在路由表小组周围手工。每个路由表中的的甜品由此可知透露单个上标的隐含级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以表明整体上标隐含。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)聚合由此可知，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖物。(e-l)相对来说同位素为每个metacluster箱支线由此可知(同位素> 0.05%)确定为HD和SP小组:存储器Treg_2 (e),存储器Treg_3 (f),存储器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +无意识T线粒体(h)、无意识T cell_1(i),无意识T cell_2 (j),无意识T cell_3 (k) n d CD49b无意识T线粒体(l)。黄色边框象征性**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon除此以外大写字母秩检测。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 用于CITRUS的系统结构证实，Treg频带的减低是方面较极快的标志。分级旁路(a - f)和葡萄分析原理(g-k)比较SP参与者和也就是说的HD参与者在CD4+CD45RA−T线粒体上的关联性。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l族裔的近现代由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR隐含顺利进行复合，模拟FlowSOM族裔。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)小组以及小分子SP 606(黄色)中的CD25+ cd127的频带概述由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+旁路子集的箱支线由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(存储器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(存储器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(存储器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+存储器T cell)。(g - i)棉花簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隐含高强度纹理，箭头值得注意的簇被识别为SP和HD数据流中间的不尽相同。(j)箱支线由此可知表明了在SP(蓝点)和HD(灰点)小组中的，CITRUS无意识Treg_3和Treg_4的相对来说同位素(%-)。(k)直方由此可知表明每个簇的表型式(粉红色)和Treg上标相对来说隐含与或多或少隐含(橙色);上列，存储器Treg_3;请注意一路上，存储器Treg_4。或多或少与所有其他簇中的上标的隐含有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon除此以外大写字母秩检测

由此可知3 与肥胖献血者比起，方面较极快者无意识treg的GITR减低。每个无意识CD4+T线粒体元簇(无意识T线粒体_1;无意识T cell_2;无意识T cell_3;CD49b +无意识T线粒体;HLA-DR + GITR +无意识T线粒体;存储器Treg_2;存储器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个隐含上标的巨大变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)数据流的隐含热由此可知(sp606不包括在内)。(c,d)无意识Treg_4元簇中的所有HD(灰色)、所有SP(橙色)和SP 606(黄色)的FlowSOM GITR隐含接在，表明直方由此可知(c)和概述由此可知(d)。Wilcoxon除此以外大写字母秩和检测，p< 0.07(黄色)所有小分子包括，p< 0.05(橙色)小分子SP 606和也就是说的HD不包括在测试中的。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中的GITR隐含，从分级旁路，从所有HD(灰色)、所有SP(橙色)和SP 606(黄色)接在，表明直方由此可知(e)和概述由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon除此以外大写字母秩检测

由此可知4 来自较极快方面的CD4+ treg线粒体控制现象CD4+T线粒体的并能降低。SP小组用橙色的支线和边框透露，HD小组用橙色的支线和边框透露，黄色的支线/边框透露小分子sp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T线粒体顺利进行分选。CD4+CD25−(需要的话者)被上标为CFSE, Treg按通过观察的%-试样。用抗CD3 /28微珠细胞分裂线粒体，培训3天内顺利进行流式线粒体术探测。(a-d)与CD4+需要的话者相对来说应的treg培训(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD需要的话者培训。(a,b,f) CFSE细胞分裂(a,e)和CFSE可抑制百分比(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制百分比。用于特征性印证(可抑制的鼓动线粒体不含treg)数值可抑制百分比。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析原理。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

由此可知5 现象CD4+T线粒体对较极快方面的T线粒体细胞分裂的可抑制更是敏感性。SP小组用橙色的支线和边框透露，HD小组用橙色的支线和边框透露，黄色的支线/边框透露小分子sp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T线粒体顺利进行分选。CD4+CD25−(需要的话者)被cfsel上标，treg按通过观察的%-试样。用抗CD3 /28微珠细胞分裂线粒体，培训3天内顺利进行流式线粒体术(CD25反染)和线粒体因子分析原理。HD Treg与HD、SP或sp606需要的话者共同培训。(a,b) CFSE细胞分裂(a)和CFSE可抑制百分比(b)。(c,d) CD25可抑制百分比(c)和CD134可抑制百分比(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培训中的的隐含。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析原理。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

假设：我们算出的假设是，来自较极快方面子的细胞分裂无意识CD4+Treg在GITR隐含中的给予了扩展和丰富，强调了进一步研究成果Treg在1型式冠心病风险幼体中的的表征的必要性。

原文应是：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28